服务介绍
质粒是现代生物学实验中不可或缺的重要工具，其质量直接关系到研究的准确性和可靠性，有研究团队对全球多个地区的科研和工业实验室的2500多个质粒进行了深入分析，结果显示，近50%的实验室自制质粒存在明显的设计缺陷和序列错误(Bai et al., bioRxiv, 2024)。受限于需要载体特异性引物、质粒骨架的排除以及无法解析重复区域、二聚体和缺失等原因，作为测序金标准的Sanger测序，在全质粒测序验证方面略显局促。基于纳米孔测序的全质粒测序，则凭借测序原理上的差异，为质粒的序列验证提供了完美的解决方案。
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服务特色
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全面评估
提供样本中所有分子测序，识别片段缺失、重组、PCR杂带或 混合质粒等问题
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极速交付
12小时内交付测序结果，质粒大小、结构复杂度无限制
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高准确度
99.9%测序成功率， 精准评估高GC、发卡结构、串联重复等难度序列以及序列两端信息
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送样便捷
不需要提供已知序列信息或测序引物，多重测序更便捷
纳米孔测序技术
纳米孔测序是一种区别于传统Sanger测序的创新测序技术，能够实现更快、更准、更便捷的测序方法。其工作原理是将DNA 的一条链通过纳米级的小孔，根据实时监测并记录核酸链通过纳米孔的电流变化图谱，直接将不同碱基产生的特征性电流信号识别成对应的碱基， 以此实现核酸序列的读取。无需PCR即能快速读取出长达上百万个碱基的读长数据，具有超长读长和实时测序的显著优势。
在对完整质粒进行测序时，纳米孔测序技术相较于传统的一代Sanger测序，展现出了更快、更准、更便捷、成功率更高的显著优势。
全质粒测序服务
| 质粒长度（bp） | 价格（元） | 交付周期（自然日） |
|---|---|---|
| ≤ 20 kb | 50元/样本 |
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| 20 kb - 50 kb | 100元/样本 | |
| 50 kb - 100 kb | 200元/样本 | |
| 100 kb - 300 kb | 500元/样本 | |
| > 300 kb | 联系我们 |
温馨提示：
* 质粒长度低于50 kb的全质粒测序服务，核酸或菌液送样均可，其中菌液送样需增加10元/样提取费用
* 质粒长度大于50 kb的全质粒测序服务，仅接受核酸送样
样本要求：
1. 菌液及平板
a. 体积≥200 μL的新鲜菌液；也可以提供≥5 mL菌液或沉淀菌体直接提取质粒。送样前请做好样品封存工作，防止漏液。
b. 培养好的平板或划线平板
* 特殊菌液标注培养条件；古菌需自行培养后送样；噬菌体样本不接收，感谢理解。
2. 质粒核酸
| 质粒长度（bp） | 浓度（Qubit） | 液量 |
|---|---|---|
| <20 kb | ≥15 ng/μL | ≥20 μL |
| 20-50 kb | ≥25 ng/μL | ≥30 μL |
| 50-100 kb | ≥50 ng/μL | ≥30 μL |
| 100-300 kb | 每50kb增加25ng/μL | ≥30 μL |
a. 溶剂：Nuclease-free Water 或 Elution buffer，溶剂中不能含有EDTA，会影响。
b. 浓度: 采用Qubit检测；使用Nanodrop进行检测的，建议不低于上述Qubit浓度要求的3倍。
c. 纯度: OD260/280 = 1.8-2.0；OD260/230 = 2.0-2.2，样本须是单克隆质粒，若是混合质粒，会倾向于给出占比更高的质粒序列。
d. 完整度: 采用琼脂糖凝胶电泳对质粒进行检测，存在明亮质粒条带，无明显拖带。
e. 送检方式: 联系当地取样员取样，或冰袋寄送。
案例分析
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